مسائل رایج الکتروفورز DNA

الکتروفورز ژل یکی از روش های اصلی مورد استفاده در زیست شناسی مولکولی برای تجزیه و تحلیل DNA است.این روش شامل مهاجرت قطعات DNA از طریق ژل است، جایی که آنها بر اساس اندازه یا شکل جدا می شوند.با این حال، آیا تا به حال در طول آزمایشات الکتروفورز خود با خطاهایی مانند نوارهای آغشته به ژل آگارز یا عدم وجود نوار روی ژل مواجه شده اید؟علت این خطاها چه می تواند باشد؟

مزاحم

تکنسین های ما زوج های عیب یابی را برای مرجع شما در اینجا خلاصه کرده اند.

1. نوارها را روی ژل آگارز آغشته کنید

نوارها را روی ژل بمالید

DNA تخریب شد.از آلودگی نوکلئاز جلوگیری کنید.

● بافر الکتروفورز تازه نیست.پس از استفاده مکرر از بافر الکتروفورز، قدرت یونی کاهش می یابد و مقدار pH آن افزایش می یابد، بنابراین ظرفیت بافر ضعیف می شود که بر اثر الکتروفورز تأثیر می گذارد.توصیه می شود به طور مکرر بافر الکتروفورز را تعویض کنید.

● از شرایط الکتروفورز نامناسب استفاده شد.اجازه ندهید ولتاژ از 20 V/cm بیشتر شود و دمای کمتر از 30 درجه سانتیگراد را در طول الکتروفورز حفظ کنید.برای الکتروفورز رشته DNA غول پیکر، دما باید کمتر از 15 درجه سانتیگراد باشد. بررسی کنید که بافر الکتروفورز ظرفیت بافر کافی دارد.

● DNA بیش از حد روی ژل بارگذاری شد.مقدار DNA را کاهش دهید.

● نمک بیش از حد در DNA.از رسوب اتانول برای حذف نمک های اضافی به صورت پیشرفته استفاده کنید.

● DNA با پروتئین آلوده شده بود.از استخراج فنل برای حذف پروتئین به صورت پیشرفته استفاده کنید.

● DNA دناتوره شد.قبل از الکتروفورز حرارت ندهید.DNA را در بافر با 20 میلی مولار NaCl رقیق کنید.

2. ناهنجاری مهاجرت باند DNA

● بازسازی محل COS قطعه λHind III.قبل از الکتروفورز، DNA را به مدت 5 دقیقه در دمای 65 درجه سانتیگراد گرم کنید و سپس آن را به مدت 5 دقیقه روی واحد یخ خنک کنید.

● از شرایط الکتروفورز نامناسب استفاده شد.اجازه ندهید ولتاژ از 20 V/cm بیشتر شود و دمای کمتر از 30 درجه سانتیگراد را در طول الکتروفورز حفظ کنید.بررسی کنید که بافر الکتروفورز ظرفیت بافر کافی دارد.

● DNA دناتوره شد.قبل از الکتروفورز حرارت ندهید.DNA را در بافر با 20 میلی مولار NaCl رقیق کنید.

3. باندهای DNA ضعیف یا بدون نوارهای DNA روی ژل آگارز

نوارهای DNA ضعیف

● مقدار یا غلظت کافی DNA روی ژل بارگذاری نشده بود.مقدار DNA را افزایش دهید.الکتروفورز ژل پلی آکریل آمید کمی حساس تر از الکتروفورز آگارز است و بارگیری نمونه را می توان به طور مناسب کاهش داد.

● DNA تخریب شد.از آلودگی نوکلئاز جلوگیری کنید.

● DNA از ژل الکتروفورز شد.ژل را برای زمان کمتری الکتروفورز کنید، از ولتاژ کمتری استفاده کنید یا از ژل درصد بالاتر استفاده کنید.

● منبع نور W نامناسب برای تجسم DNA رنگ آمیزی شده با اتیدیوم بروماید استفاده شد.برای حساسیت بیشتر از نور با طول موج کوتاه (254 نانومتر) W استفاده کنید.

4. نوارهای DNA از دست رفته است

DNA اندازه کوچک از روی ژل الکتروفورز شد.ژل را برای زمان کمتری الکتروفورز کنید، از ولتاژ کمتری استفاده کنید یا از ژل درصد بالاتر استفاده کنید.

● تشخیص باندهای DNA مولکولی مشابه مشکل است.زمان الکتروفورز را افزایش دهید و غلظت را بررسی کنیداز ژل اطمینان حاصل کنید که درصد ژل به درستی استفاده شده است.

● DNA دناتوره شد.قبل از الکتروفورز حرارت ندهید.DNA را در بافر با 20 میلی مولار NaCl رقیق کنید.

● رشته های DNA بزرگ هستند و الکتروفورز ژل معمولی مناسب نیست.آنالیز بر روی الکتروفورز ژل پالس.چه مشکلات دیگری با الکتروفورز ژل آگارز داشتید؟برای راهنماها در آینده بیشتر تحقیق خواهیم کرد.

Beijing Liuyi biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) یک شرکت تخصصی با تمرکز بر محصولات مرتبط با الکتروفورز در چین است.داستان آن از سال 1970 شروع می شود، زمانی که چین هنوز وارد اصلاحات و زمان باز نشده بود.در طول سال ها توسعه، Liuyi Bitotech دارای نام تجاری خاص خود است که در بازار داخلی برای محصولات الکتروفورز به عنوان برند Liuyi شناخته می شود.

برند Liuyi بیش از 50 سال سابقه در چین دارد و این شرکت می تواند محصولات پایدار و باکیفیت را در سراسر جهان ارائه دهد.از طریق توسعه سالها، شایسته انتخاب شماست!

سلول های الکتروفورز افقی (مخازن / محفظه ها) Liuyi Biotech با کیفیت بالا و ظاهر خوب هستند.با اندازه های مختلف سینی های ژل، آنها می توانند نیازهای آزمایشی مختلف شما را برآورده کنند.ما تیم فنی و کارخانه خودمان را داریم.از طراحی تا ساخت، مواد اولیه تا قطعات کلیدی، ما می توانیم کل فرآیند را کنترل کنیم.سری DYCP 31 برای الکتروفورز DNA است که مدل هستندDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN، وDYCP-31E.تفاوت بین آنها اندازه و قیمت ژل است.ما اندازه کامل محصولات را برای مشتریان خود ارائه می دهیم.مدلDYCP-32Cمی تواند بزرگترین ژل 250mm*250mm را بسازد.

1-1

در همین حال، ما منبع تغذیه الکتروفورز خود را توصیه می کنیمDYY-6C،DYY-6DوDYY-10Cبرای سلول های الکتروفورز ما (مخازن / محفظه ها) سری DYCP-31 و 32.

1-4

اگر اطلاعات بیشتری در مورد محصولات می‌خواهید، لطفاً برای دریافت اطلاعات بیشتر از این وب‌سایت دیدن کنید و از طریق ایمیل با ما تماس بگیرید تا آنچه را که می‌خواهید به ما اطلاع دهید و ببینید آیا ما می‌توانیم راه‌حل‌هایی را برای شما ارائه دهیم.

برای اطلاعات بیشتر در مورد ما، لطفا از طریق ایمیل با ما تماس بگیرید[email protected], [email protected]


زمان ارسال: مه-09-2022