تهیه ژل آگارز برای الکتروفورز

تهیه ژل آگارز برای الکتروفورز

توجه: همیشه دستکش یکبار مصرف بپوشید!

دستورالعمل های گام به گام

توزین پودر آگارز:uکاغذ توزین و ترازوی الکترونیکی را برای اندازه گیری 0.3 گرم پودر آگارز (بر اساس سیستم 30 میلی لیتری) مشاهده کنید.

آماده سازی بافر TBST:p30 میلی لیتر بافر 1 برابر TBST را در یک فلاسک ارلن 100 میلی لیتری آماده کنید.

حل کردن پودر آگارز:pپودر آگارز را داخل بافر TBST بریزید و خوب تکان دهید.آنها را داخل کنیددر مایکروویو قرار دهید و حرارت دهید (معمولاً به مدت 50 ثانیه، با فویل آلومینیومی پوشانده شده است) تا کاملا حل شود.

خنک کردن و اضافه کردن هسته:uدستکش بزنید تا مخلوط را از مایکروویو خارج کنید و بگذارید کمی در آب سرد خنک شود تا گرم شود (تقریباً 60 درجه سانتیگراد). 2µl نوکلئاز (جایگزین Eb) را در حین تکان دادن اضافه کنید تا کاملا مخلوط شود.

آماده سازی قالب ژل:

  • Cلاغر و خشک کنیدسینی ژل و دستگاه ریخته گری ژلمخزن الکتروفورز
  •  Pتوری ژلسینیداخل مخزن داخلی و شانه را در یک موقعیت ثابت قرار دهید.
  • محلول ژل آگارز را که تا دمای حدود 65 درجه سانتیگراد خنک شده مخلوط کرده و با احتیاط روی آن بریزید.سینی ژلدردستگاه ریخته گری ژلآن را به آرامی پخش کنید تا یک لایه ژله ای یکنواخت روی صفحه شیشه ای ایجاد شود.
  • اجازه دهید در دمای اتاق بماند تا ژل کاملا جامد شود.
  • به آرامی شانه را به صورت عمودی بردارید و نوار را بردارید.
  • ژل را قرار دهیدسینیداخل مخزن الکتروفورز

مهم: مطمئن شوید که در ناحیه دندانه های شانه حباب هوا وجود ندارد. سطح مایع باید صاف و بدون موج باشد.

اجرای ژل

بارگیری ژل

پس از جامد شدن ژل، آن را در مخزن الکتروفورز قرار دهید و بافر الکتروفورز را بریزید تا ژل در آب فرو برود.

آماده سازی نمونه ها

  • نشانگر و بافر بارگیری را از یخچال بردارید.
  • 6 میکرولیتر بافر بارگیری را به نمونه ها اضافه کنید و خوب مخلوط کنید.
  • با استفاده از میکروپیپت، نمونه ها را به آرامی داخل چاهک های بزرگ ژل قرار دهید (مراقب باشید ژل سوراخ نشود و برای جلوگیری از ایجاد حباب هوا، کل حجم را پخش نکنید).
  • نشانگر را در هر یک از چاه های کوچک قرار دهید (موقعیت آن را به خاطر بسپارید).

شروع الکتروفورز

  • مخزن الکتروفورز را بپوشانید و بلافاصله پس از بارگیری ژل الکتروفورز را شروع کنید.
  • ولتاژ را روی 60-100 ولت تنظیم کنید. نمونه ها از الکترود منفی (سیاه) به الکترود مثبت (قرمز) مهاجرت می کنند.
  • ولتاژ بالاتر محدوده جداسازی موثر ژل آگارز را کوتاه می کند.
  • هنگامی که رنگ بروموفنل آبی به حدود 1 سانتی متر از لبه پایین صفحه ژل رسید، الکتروفورز را متوقف کنید.

مشاهده نتایج

پس از جدا کردن باندها، الکتروفورز را متوقف کنید، ژل را خارج کنید و مستقیماً آن را شناسایی و از آن عکس بگیرید.

از یک سیستم تصویربرداری ژل برای عکاسی و مشاهده باندها استفاده کنید (بررسی کنید که آیا نوارهایی برای نشانگر یا نمونه ها وجود دارد).

پس از به دست آوردن نقشه نوار ژل خود، نشانگر را پیدا کنید. بر اساس نشانگر، می توانید باندهای هدف را تعیین کنید!

2

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) بیش از 50 سال است که محصولات الکتروفورز تولید می کند. ما سیستم های الکتروفورز افقی خود را در اینجا ارائه می دهیمژل آگارزالکتروفورزانتخاب کنیدسیستم های الکتروفورز افقیاز Beijing liuyi برای آزمایش الکتروفورز ژل شما برای کمک به تحقیقات شما در صنعت بیوتکنولوژی.

3

ما مدل های مختلفی از مخازن الکتروفورز افقی را برای ریخته گری و اجرای کوچک ارائه می دهیمآگارزژل به بزرگآگارزژل ها

راهنمای انتخاب واحد الکتروفورز ژل غوطه ور افقی

图片1

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) بیش از 50 سال است که با تیم فنی حرفه ای خود و مرکز تحقیق و توسعه در ساخت ابزارهای الکتروفورز تخصص دارد. ما خط تولید قابل اعتماد و کامل از طراحی تا بازرسی و انبار و همچنین پشتیبانی بازاریابی داریم. محصولات اصلی ما سلول الکتروفورز (مخزن/محفظه)، منبع تغذیه الکتروفورز، ترانزیل کننده LED آبی، ترانسیلومیاتور UV، ژل تصویر و سیستم آنالیز و غیره است. ما همچنین ابزار آزمایشگاهی مانند ابزار PCR، میکسر ورتکس و سانتریفیوژ را برای آزمایشگاه عرضه می کنیم.

اگر برنامه ای برای خرید محصولات ما دارید، لطفا با ما تماس بگیرید. می توانید به ایمیل ما پیام ارسال کنید[ایمیل محافظت شده]یا[ایمیل محافظت شده]، یا لطفاً با ما تماس بگیرید +86 15810650221 یا واتساپ +86 15810650221 یا وی چت: 15810650221 را اضافه کنید.

لطفاً کد QR را اسکن کنید تا در Whatsapp یا WeChat اضافه کنید.

2


زمان ارسال: آگوست-09-2024