الکتروفورز ژل DNA یک تکنیک متداول زیست شناسی مولکولی است که برای جداسازی و تجزیه و تحلیل قطعات DNA بر اساس اندازه آنها استفاده می شود. این فرآیند شامل بارگذاری قطعات DNA با اندازه های مختلف بر روی ژلی ساخته شده از آگارز، کربوهیدرات موجود در جلبک قرمز است.
آماده سازی و ریخته گری ژل آگارز
- آگارز را در مقدار مناسب بافر الکتروفورز حل کنید. غلظت ژل با نسبت جرم به حجم تعیین می شود، مانند 1 گرم آگارز در 100ml بافر برای یک ژل 1٪.
- مخلوط را در مایکروویو گرم کنید و ظرف را بچرخانید تا از حل شدن کامل آگارز اطمینان حاصل کنید.
- اتیدیوم بروماید را تا غلظت نهایی 0.5 به محلول ژل اضافه کنیدمیلی گرم/ ml. اتیدیوم بروماید بین جفت‌های باز DNA مجاور قرار می‌گیرد و فلورسانس نارنجی را زیر نور UV منتشر می‌کند. توجه داشته باشید که اتیدیوم بروماید یک ماده سرطان زا است، بنابراین رسیدگی به آن نیاز به اقدامات ایمنی مناسب مانند پوشیدن دستکش دارد.
- محلول ژل را در یک حمام آب خنک کنید تا از تاب برداشتن سینی ژل به دلیل دمای بالا جلوگیری کنید.
- یک شانه را در محلول ژل قرار دهید تا چاه های نمونه تشکیل شود. شانه های مناسب برای مقدار نمونه DNA که بارگیری می کنید انتخاب کنید. محلول ژل آگارز را داخل آن بریزیدسینی ژلو اجازه دهید در دمای اتاق جامد شود.
- هنگامی که ژل جامد شد، شانه را بردارید. اگر فوراً از ژل استفاده نمی کنید، آن را در پلاستیک بپیچید و تا زمانی که نیاز باشد در دمای 4 درجه سانتیگراد نگهداری کنید.
آماده سازی و اجرای ژل
قبل از شروع الکتروفورز، نمونه DNA را با بافر بارگذاری مخلوط کنید. بافر بارگذاری معمولاً 6 برابر متمرکزتر است و به نمونه کمک می کند تا در کف چاهک ها فرو رود و حرکت را در طول الکتروفورز دنبال کند.
منبع تغذیه را روی ولتاژ مشخص شده تنظیم کنید.
مقدار کافی بافر الکتروفورز را به مخزن ژل اضافه کنید تا سطح ژل را بپوشاند.اطمینان حاصل کنیداتصالات صحیح الکترود
نمونه DNA و نشانگرهای وزن مولکولی را در چاهک های ژل بارگذاری کنید.
منبع تغذیه را برای شروع الکتروفورز روشن کنید.
مشاهده قطعات جدا شده DNA
پس از الکتروفورز، منبع تغذیه را خاموش کرده و ژل را خارج کنید.
از منبع نور UV برای روشن کردن ژل استفاده کنید. قطعات DNA به صورت نوارهای فلورسنت نارنجی ظاهر می شوند.
تصویر ژل را برای تجزیه و تحلیل قطعات جدا شده DNA مستند کنید.
پس از انجام آزمایش، با رعایت دستورالعمل های آزمایشگاهی، از دفع مناسب ژل و بافر الکتروفورز اطمینان حاصل کنید. همیشه هنگام کار با ژل ها و بافرهای حاوی اتیدیوم بروماید برای محافظت در برابر قرار گرفتن در معرض این ماده خطرناک دستکش بپوشید.
الکتروفورز ژل DNA به طور گسترده در تحقیقات زیست شناسی مولکولی و ژنتیک برای تخمین اندازه مولکول های DNA، جداسازی قطعات DNA، تشخیص جهش های ژنی و انگشت نگاری DNA، از جمله کاربردهای دیگر استفاده می شود. این یک تکنیک آزمایشی ساده و موثر است که به درک ترکیب و ویژگی‌های نمونه‌های DNA کمک می‌کند.
Beijing Liuyi Biotechnology Co.Ltd، یک تولید کننده حرفه ای با تمرکز بر محصولات الکتروفورز بیش از 50 سال، طیف وسیعی از مخازن الکتروفورز (محفظه/سلول) را برای الکتروفورز ژل ارائه می دهد، مانند تانک های الکتروفورز افقی (محفظه ها/سلول ها)DNAالکتروفورز ژل، و مخازن الکتروفورز عمودی (محفظه/سلول) برای الکتروفورز ژل پروتئینی. در همین حال، انواع مختلفی از منبع تغذیه الکتروفورز، آنالایزر جعبه تاریک کابینت و transilluminator UV را نیز ارائه می دهد. برای اندازه گیری وزن مولکولی RNA و جداسازی RNA با اندازه های مختلف برای آزمایشگاه خود می توانید مخازن الکتروفورز Beijing Liuyi (محفظه/سلول) را انتخاب کنید.
در اینجا ما خواهیم کردتوصیه می کنندیک نوع مدل مخزن الکتروفورز افقی (محفظه/سلولی).DYCP-31DN برای ساخت و اجرای ژل.
پس از اجرای ژل، می توانید از مدل سیستم تصویر و تحلیل ژل ما استفاده کنیدWD-9413Bبرای مشاهده، تجزیه و تحلیل و گرفتن عکس برای ژل. Liuyi Biotech همچنین برای مشاهده ژل، دستگاه UV transilluminator (آنالایزر UV) را ارائه می دهد. ما مدل جعبه سیاه UV transilluminator (UV Analyzer) داریمWD-9403A،9403C،WD-9403F، مدل UV transilluminator پرتابل (UV Analyzer).WD-9403Bو ترانزیلاتور UV دستی (آنالایزر UV)WD-9403Eبرای شما انتخاب کنید
نام تجاری Beijing Liuyi بیش از 50 سال سابقه در چین دارد و این شرکت می تواند محصولات پایدار و باکیفیت را در سراسر جهان ارائه دهد. از طریق سالها توسعه، شایسته انتخاب شماست!
ما اکنون به دنبال شرکای هستیم، هم مخزن الکتروفورز OEM و هم توزیع کنندگان مورد استقبال قرار می گیرند.
اگر برنامه ای برای خرید محصولات ما دارید، لطفا با ما تماس بگیرید. می توانید به ایمیل ما پیام ارسال کنید[ایمیل محافظت شده]یا[ایمیل محافظت شده]، یا لطفاً با ما تماس بگیرید +86 15810650221 یا واتساپ +86 15810650221 یا وی چت: 15810650221 را اضافه کنید.
زمان ارسال: آگوست-08-2023