آماده سازی نمونه ودر حال بارگذاری
به دلیل استفاده از سیستم بافر پیوسته بدون انباشتن ژل در اکثر موارد، نمونه ها باید غلظت مناسب و حجم کمی داشته باشند. استفاده از aپیپتبرای جلوگیری از کاهش قابل توجه وضوح، نمونه را به آرامی با 5-10 میکروگرم در هر چاه اضافه کنید. چه زمانیدر حال بارگذاری نمونه، منبع تغذیه باید خاموش باشد. نمونه باید حاوی یک رنگ نشانگر (0.025٪ بروموفنل آبی یا نارنجی) و ساکارز (10-15٪) یا گلیسرول (5-10٪) باشد تا چگالی آن افزایش یابد، نمونه غلیظ شود و از انتشار جلوگیری شود. با این حال، گاهی اوقات ساکارز یا گلیسرول ممکن است باعث ایجاد نوارهای U شکل در نتایج الکتروفورز شود که با استفاده از 2.5٪ فیکول (پلی وینیل پیرولیدون) می توان از آن جلوگیری کرد.
الکتروفورز
ولتاژ برای الکتروفورز 5-15 V/cm است، معمولاً حدود 10 V/cm. برای جداسازی مولکول های بزرگ، ولتاژ باید کمتر باشد، معمولاً از 5 V/cm تجاوز نمی کند.
رنگ آمیزی
رنگ فلورسنت اتیدیوم بروماید (EB) معمولاً برای رنگ آمیزی برای مشاهده نوارهای DNA در ژل آگارز استفاده می شود. EB می تواند بین جفت باز مولکول های DNA وارد شود و باعث اتصال EB به DNA شود. جذب نور فرابنفش 260 نانومتری توسط DNA به EB منتقل می شود و EB محدود شده فلورسانس را در طول 590 نانومتر در ناحیه قرمز-نارنجی طیف نور مرئی ساطع می کند. رنگ آمیزی ژل در محلول 1 میلی مول در لیتر MgSO4 به مدت 1 ساعت می تواند فلورسانس پس زمینه ناشی از EB را کاهش دهد و تشخیص مقادیر کمی از DNA را تسهیل کند.
رنگ EB چندین مزیت دارد: استفاده از آن آسان است، اسیدهای نوکلئیک را نمی شکند، حساسیت بالایی دارد و می تواند DNA و RNA را رنگ آمیزی کند. EB را می توان با استفاده از جذب UV در هر زمان به نمونه اضافه کرد و ردیابی کرد. پس از رنگ آمیزی، EB را می توان با استخراج با n-بوتانول حذف کرد.
با این حال، رنگ EB یک جهش زا قوی است و اقدامات احتیاطی مانند پوشیدن دستکش های پلی اتیلن باید در حین کار انجام شود. آکریدین نارنجی نیز یک رنگ رایج است که می تواند بین اسیدهای نوکلئیک تک رشته ای و دو رشته ای (DNA, RNA) تمایز قائل شود. فلورسانس سبز (530 نانومتر) برای اسیدهای نوکلئیک دو رشته ای و فلورسانس قرمز (640 نانومتر) برای اسیدهای نوکلئیک تک رشته ای را نشان می دهد. علاوه بر این، رنگ های دیگری مانند متیلن بلو، متیلن سبز و کینولین B را می توان برای رنگ آمیزی استفاده کرد.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) بیش از 50 سال است که با تیم فنی حرفه ای خود و مرکز تحقیق و توسعه در ساخت ابزارهای الکتروفورز تخصص دارد. ما خط تولید قابل اعتماد و کامل از طراحی تا بازرسی و انبار و همچنین پشتیبانی بازاریابی داریم. محصولات اصلی ما سلول الکتروفورزیس (مخزن/محفظه)، منبع تغذیه الکتروفورز، ترانسیلومیاتور LED آبی، ترانسیلوماتور UV، سیستم تصویر و تحلیل ژل و غیره است.
ما اکنون به دنبال شرکای هستیم، هم مخزن الکتروفورز OEM و هم توزیع کنندگان مورد استقبال قرار می گیرند.
اگر برنامه ای برای خرید محصولات ما دارید، لطفا با ما تماس بگیرید. می توانید به ایمیل ما پیام ارسال کنید[ایمیل محافظت شده]یا[ایمیل محافظت شده]، یا لطفاً با ما تماس بگیرید +86 15810650221 یا واتساپ +86 15810650221 یا وی چت: 15810650221 را اضافه کنید.
لطفاً کد QR را اسکن کنید تا در Whatsapp یا WeChat اضافه کنید.
زمان ارسال: دسامبر-20-2023